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    免疫組化實(shí)驗(yàn)詳細(xì)步驟匯總

    發(fā)布時(shí)間: 2024-06-11  點(diǎn)擊次數(shù): 389次

    步驟:

    1.切片準(zhǔn)備:將組織進(jìn)行石蠟包埋,切成薄片并貼附于載玻片上。-用到的產(chǎn)品:載玻片等。

    2.烤片:將切片放入烤箱中適當(dāng)溫度烤片,使切片緊密貼附。

    3.脫蠟:依次使用二甲苯等進(jìn)行脫蠟處理。

    - 用到的產(chǎn)品:二甲苯、乙醇等。

    4.水化:梯度乙醇水化至水。

    5.抗原修復(fù):根據(jù)需要選擇合適的抗原修復(fù)方法,如熱修復(fù)或酶修復(fù)等。

    - 用到的產(chǎn)品:抗原修復(fù)液等。

    6. 滅活內(nèi)源性過氧化物酶:使用過氧化氫溶液處理。

    - 用到的產(chǎn)品:3%過氧化氫溶液。

    7. 封閉:用血清或 BSA 等封閉非特異性結(jié)合位點(diǎn)。

    - 用到的產(chǎn)品:封閉液。

    8. 一抗孵育:滴加特異性一抗,濕盒中孵育。

    - 用到的產(chǎn)品:一抗。
    9. 洗片:用 PBS 多次沖洗。
    10. 二抗孵育:加入相應(yīng)二抗孵育。
    - 用到的產(chǎn)品:二抗。
    11. 洗片:再次 PBS 洗。
    12. 顯色:使用合適的顯色劑顯色,如 DAB 等。
    - 用到的產(chǎn)品:DAB 顯色試劑盒等。
    13. 復(fù)染:如用蘇木精復(fù)染細(xì)胞核。
    - 用到的產(chǎn)品:蘇木精染液等。
    14. 脫水透明:梯度乙醇脫水,二甲苯透明。
    15. 封片:中性樹膠封片。


    需要注意的是,具體步驟和產(chǎn)品可能因?qū)嶒?yàn)條件和抗體要求等有所不同,在實(shí)際操作中需根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行調(diào)整和優(yōu)化。


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