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    提取基因組,細(xì)胞裂解是用物理方法、化學(xué)法還是酶解法?

    發(fā)布時(shí)間: 2024-06-06  點(diǎn)擊次數(shù): 413次

    提取基因組,細(xì)胞裂解是用物理方法、化學(xué)法還是酶解法?

    1. 物理方法

    2. 化學(xué)方法

    大部分用化學(xué)法,但也有可能搭配使用。


    細(xì)胞裂解的物理放方法指的是機(jī)械破碎,如勻漿法、研磨法、超聲波處理法,還有反復(fù)凍融的方法。酶解法是將溶菌酶或蛋白酶K將入,使細(xì)胞壁破碎。化學(xué)法是使用含SDS或CTAB的溶液來(lái)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行處理,在一定的pH環(huán)境和變性條件下,細(xì)胞破裂,蛋白質(zhì)變性沉淀,核酸被釋放到水相


    現(xiàn)在常用的是基因組提取試劑盒,大部分是用化學(xué)法裂解的。


    但如果碰上一些特殊的實(shí)驗(yàn)樣本,還需要多種方法搭配使用。


    例如真菌,僅靠化學(xué)方法無(wú)法有效裂解,理解的方法是先機(jī)械破碎,同時(shí)搭配破壁酶降解細(xì)胞外壁,最后才是化學(xué)試劑破壞細(xì)胞膜。


    那些擁有堅(jiān)硬外殼、骨架或復(fù)雜的化學(xué)外層的樣本,還需要進(jìn)行一些預(yù)處理,例如粗分離,過(guò)濾掉大顆粒的雜志。


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